革蘭氏試驗(MW991)
GRAM TEST

原理(Principle)︰
革蘭氏試驗被設計用來提供快速的區別革蘭氏陽性(Gram-positive)和革蘭氏陰性(Gram-negative)好氧菌aerobes和兼性厭氧菌facultative anaerobes的。這個試驗植基於使用一個產色的酵化物L-alanine-4-nitroanilide(LANA)試劑來測試在革蘭氏陰性(Gram-negative)有機體organisms的細胞壁上所存在的胺基呔酶aminopeptidase。每一個試紙條上含有無色的LANA試劑。 細胞壁上的胺基呔酶aminopeptidase水化LANA試劑產生鮮黃色的硝基苯胺。革蘭氏陽性(Gram-positive)不會產生任何顏色的改變。
注意:革蘭氏試驗對於微量需氧菌microaerophilic和完全厭氣的細菌無法給與可靠的結果。
反應(Reaction)︰
LANA試劑 + aminopeptidase胺基呔酶 →→→→→→ Nitroaniline硝基苯胺
Colourless無色的 Bright Yellow鮮黃色
試驗步驟(Procedure)︰
1. 放一片革蘭氏試驗試紙條在一個乾淨的顯微鏡載玻片上。
2. 在試圈上用一滴所提供的活化試劑(Activating agent)來弄濕。
3. 用接種環(Wire loop)從分離培養基(isolation media)中取出一個或數個菌落直接抹搽
這些菌落到試紙條上。
4. 等待一分鐘觀察反應。
5. 顏色從白色變黃指示出陽性反應-革蘭氏陰性(Gram-negative)反應。
6. 革蘭氏陽性(Gram-positive)有機體organisms不會在試紙條上產生任何顏色的改變。
品質控制︰ 每一批都用E.coli及Staph aureus測試過。
儲存︰ 請儲存在2-8℃保持在暗處。
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中華民國 九十五 年 九 月 十 日校譯